品牌:QIAGEN | 规格:25 QIAGEN-tip 20, Reagents, Buffers | 型号:12123 |
纯化至多10 mg转染级质粒或柯斯质粒DNA
纯化得到相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度
高产量质粒DNA
经济的制备方法
使用LyseBlue,获得的裂解效果和的DNA产量
QIAGEN Plasmid Kits应用重力流阴离子交换柱纯化转染级质粒DNA。该试剂盒可纯化获得至多10 mg的质粒DNA。离心获得澄清的裂解产物和异丙醇沉淀。
QIAGEN Plasmid Kit实验流程。
将中性细菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge内孵育,数秒内即可过滤澄清。然后将澄清的裂解物上样至阴离子交换纯化柱,在适当的低盐和pH条件下,质粒DNA会选择性地结合上去。利用中盐浓度的洗涤液去除RNA、蛋白质、代谢物及其他低分子量杂质,使用高盐缓冲液洗脱超纯的质粒DNA。利用异丙醇沉淀对DNA进行浓缩并脱盐,并通过离心收集。
性能
QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN阴离子交换柱技术高效纯化质粒DNA。产量可达10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 ?g(Maxi)、或100 ?g(Midi)高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌株和培养基。)QIAGEN Plasmid Kits纯化的质粒DNA适合多种应用,如:转染(参见Transfection efficiency versus plasmid purification method)、克隆和体外转录。
原理
QIAGEN-tips内独特的阴离子交换树脂专为纯化核酸设计。它独特的分离特性,使纯化的DNA的纯度相当于连续2次CsCl梯度离心得到的DNA纯度。预装的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,缩短了纯化质粒的手动操作时间。整套QIAGEN质粒纯化体系避免苯酚、氯仿、溴化乙锭和CsCl等有毒物质,减小对使用者和环境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,细菌裂解物通过离心澄清。澄清后的裂解物上样到阴离子交换柱,质粒DNA在适当的低盐条件和pH条件下与树脂进行选择性结合。RNA、蛋白质、代谢产物和和其它低分子量杂质用中盐洗涤液去除,用高盐缓冲液洗脱纯质粒DNA(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures)。得到的DNA用异丙醇沉淀浓缩和脱盐后,离心收集。
应用
QIAGEN Plasmid Kits纯化质粒DNA适合多种应用,如:
转染
克隆
PCR
体外转录
QIAGEN 其他常用产品:
名 称 | 货 号 | |
质粒纯化 | QIAGEN Plasmid Mini Kit | 12123; 12125 |
胶回收/PCR回收 | QIAquick PCR Purification Kit | 28104; 28106 |
血液DNA纯化 | QIAamp DNA Blood Mini Kit | 51104; 51106 |
组织DNA纯化 | QIAamp DNA Micro Kit | 56304; |
病毒RNA纯化 | QIAamp Viral RNA Mini Kit | 52904; 52906 |
逆转录试剂 | Omniscript RT Kit | 205110; 205111; 2051 13 |
定量试剂 | QuantiFast Kits | 204054; 204056; 2041 54; 204156; 204057 |
Qiagen 备货 | |||
Qiagen | 12123 | QIAGEN Plasmid Mini Kit (25) | 纯化转染级质粒试剂盒 |
Qiagen | 12143 | QIAGEN Plasmid Midi Kit (25) | 质粒中提试剂盒 |
Qiagen | 12145 | QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) | 质粒中提试剂盒 |
Qiagen | 12163 | QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25) | 质粒大提试剂盒 |
Qiagen | 12191 | QIAGEN Plasmid Giga Kit (5) | 纯化转染级质粒试剂盒 |
Qiagen | 12362 | EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) | 质粒大提试剂盒 |
Qiagen | 12381 | EndoFree Plasmid Mega Kit (5) | 纯化无内毒素超转染级纯质粒或柯斯质粒DNA |
Qiagen | 20021 | QIAEX II Gel Extraction Kit (150) | 从琼脂糖凝胶和溶液中回收纯化DNA片段 |
Qiagen | 27104 | QIAprep Spin Miniprep Kit (50) | 提取高纯度质粒DNA |
Qiagen | 27106 | QIAprep Spin Miniprep Kit (250) | 提取高纯度质粒DNA |
Qiagen | 28004 | MinElute PCR Purification Kit (50) | 微量PCR回收试剂盒 |
Qiagen | 28104 | QIAquick PCR Purification Kit (50) | PCR回收试剂盒 |
Qiagen | 28106 | QIAquick PCR Purification Kit (250) | PCR回收试剂盒 |
Qiagen | 28304 | QIAquick Nucleotide Removal Kit (50) | 从酶促反应物中回收纯化 |
Qiagen | 28306 | QIAquick Nucleotide Removal Kit (250) | 从酶促反应物中回收纯化 |
Qiagen | 28704 | QIAquick Gel Extraction Kit (50) | 胶回收试剂盒 |
Qiagen | 28706 | QIAquick Gel Extraction Kit (250) | 胶回收试剂盒 |
Qiagen | 30210 | Ni-NTA Agarose (25 ml) | 6His蛋白纯化柱料 |
Qiagen | 51104 | QIAamp DNA Blood Mini Kit (50) | 血液DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 51106 | QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) | 血液DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 51183 | QIAamp DNA Blood Midi Kit (20) | 血液DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 51304 | QIAamp DNA Mini Kit (50) | 人类组织和细胞DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 51306 | QIAamp DNA Mini Kit (250) | 人类组织和细胞DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 52904 | QIAamp Viral RNA Mini Kit (50) | RNA病毒提取试剂盒 |
Qiagen | 56404 | QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (50) | 从石蜡包埋组织中纯化DNA试剂盒 |
Qiagen | 59104 | EpiTect Bisulfite Kit (48) | 甲基化转化试剂盒 |
Qiagen | 69104 | DNeasy Plant Mini Kit (50) | 从植物细胞和组织或真菌样本中纯化总DNA |
Qiagen | 69504 | DNeasy Blood & Tissue Kit (50) | 血液,组织DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 69506 | DNeasy Blood & Tissue Kit (250) | 血液,组织DNA提取试剂盒 |
Qiagen | 70022 | Oligotex mRNA Mini Kit (12) | 从总RNA、细胞核组织中纯化回收 |
Qiagen | 74104 | RNeasy Mini Kit (50) | 细胞组织RNA提取试剂盒 |
Qiagen | 74106 | RNeasy Mini Kit (250) | 细胞组织RNA提取试剂盒 |
Qiagen | 74134 | RNeasy Plus Mini Kit (50) | 从细胞和组织样本中纯化总RNA |
Qiagen | 74903 | RNeasy Plant Mini Kit (20) | 从植物和真菌中纯化总RNA |
Qiagen | 74904 | RNeasy Plant Mini Kit (50) | 从植物和真菌中纯化总RNA |
Qiagen | 79254 | RNase-Free DNase Set (50) | DNA降解酶 |
Qiagen | 217004 | miRNeasy Mini Kit (50) | microRNA提取试剂盒 |
Qiagen | 210210 | QIAGEN OneStep RT-PCR Kit (25) | 反转录试剂盒 |
Qiagen | 210212 | QIAGEN OneStep RT-PCR Kit (100) | 反转录试剂盒 |
Qiagen | 301425 | Effectene Transfection Reagent (1 ml) | 对原代细胞和敏感细胞的DNA转化 |
Qiagen | 76106 | RNAlater (250ml) |
|
Qiagen | 301705 | HiPerFect Transfection Reagent (1 ml) |
|
Qiagen | 12943 | QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit (25) |
|
Qiagen | 205111 | Omniscript RT Kit (50) |